分子克隆和質粒載體構建

  分子克隆是指在分子水平上提供一種純化和擴增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，
用體外重組方法將它們插入克隆載體，形成重組克隆載體，通過轉化與轉導的方式，引入
適合的寄主體內得到復制與擴增，然后再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體，
可以得到插入DNA的許多拷貝，從而獲得目的基因的擴增。

  載體構建是分子生物學研究中最常用的實驗技術。為把DNA分子運送到受體細胞中去，
必須尋找一種能進入細胞、在裝載了外來的DNA片段后仍能照樣復制的運載體。理想的運
載體是質粒(plasmid)，在基因工程中，常用人工構建的質粒作為載體

本公司可以根據您的實驗要求為您完成分子克隆和載體構建及改造的任務。

一、載體構建的基本實驗步驟

(1)目的DNA片段和載體的制備；

(2)目的DNA片段和載體的連接；

(3)連接產物的轉化；

(4)克隆篩選。

(5)測序驗證及結果交付；

二、詳細內容
1、以PCR擴增為基礎的各類載體構建，如大腸桿菌表達載體、酵母表達載體、桿狀病毒表達載體、哺乳動物表達載體、報告基因載體、細菌表達載體 、穿梭質粒等；
2、基因定點突變，包括單點突變，多點突變，基因缺失等；
3、載體元件替換和改造；
4、siRNA載體和miRNA表達載體構建；
5、過表達載體構建。